Діагностичний напрямок
Виявлення генетичних порушень
Загальна характеристика
** У випадку, коли каріотипування зробити неможливо у зв’язку з низькою мітотичною активністю клітин ворсин хоріону, за замовчуванням виконується FISH, 8 хромосом: 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y (матеріал – абортус). Термін виконання каріотипування: 12 д. / 13,5 д. Термін виконання FISH: 7 д. / 8,5 д.
Каріотипування (Karyotyping) - стандартне цитогенетичне дослідження, яке проводиться з метою виявлення порушень кількості і структури хромосом. При перериванні вагітності, з метою визначення причин, які б могли привести до переривання вагітності, проводиться каріотипування абортивного матеріалу.
Каріограма - порядкове подання 46 хромосом (каріотипу), які пофарбовані спеціальним методом G-бендінг (GTG) - забарвлення із застосуванням трипсину і барвника Гімзи (G-смуги - темні) для візуалізації та диференціювання хромосом.
FISH*-метод – молекулярно-цитогенетичний метод, що полягає в реакції гібридизації між штучно створеним ДНК-зондом і комплементарною до нього нуклеотидною послідовністю ядерної ДНК. Аналіз проводиться на інтерфазних ядрах. Перелік хромосом, що виявляться пренатально FISH-методом, включає хромосоми 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y.
* Флуоресцентна in situ гібридизація
Важливо: провести дослідження при розміщенні біологічного матеріалу у формалін НЕМОЖЛИВО!
Показання для призначення
Визначення причин переривання вагітності з 5 до 11 тижнів.
Маркер
Маркер хромосомних порушень.
Клінічна значущість
Приблизно половина втрат вагітності в першому триместрі зумовлена хромосомними аномаліями плода. Каріотипування є «золотим стандартом» діагностики, адже надає інформацію про кількість та структуру всіх хромосом. Проте приблизно у 20% випадків каріотипування провести неможливо у зв’язку з низькою мітотичною активністю клітин. У таких випадках використовується FISH-аналіз на виявлення хромосом, кількісні зміни яких найчастіше є причиною викиднів. Використання панелі на хромосоми 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y FISH-методом дозволяє виявити 60-70% хромосомних відхилень при втраті вагітності.
Склад показників:
FISH на 8 хромосом: 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y
Правила підготовки пацієнта
абортус
Правила доставки біоматеріалів до лабораторії
абортус
Біоматеріал для дослідження: Абортус. Тип пробірки, об’єм БМ в пробірці: Стерильний контейнер з кришкою / NaCl 0,9%. Умови доставки: Температура від 4 до 8 градусів, 24 год. Коментар: доставка 24 год у транспортному середовищі NCl 0,9% або 48 год з додаванням гепарину до NCl0,9% у співвідношенні 1:100.
Інтерференція:
Не виявлено.
Не виявлено.
Інтерпретація:
Інтерпретація результатів виконується лікарем-генетиком.
Каріотипування: 46, ХХ - нормальний жіночий каріотип, 46, XY - нормальний чоловічий каріотип. Для уніфікації цитогенетичних досліджень розроблена Міжнародна цитогенетична номенклатура хромосом людини (ISCN, 1978), заснована на диференціальному фарбуванні хромосом по довжині. Ця номенклатура дозволяє докладно описати кожну хромосому: її порядковий номер, плече (р - коротке плече, q - довге плече) район, смугу і навіть субполосу. [номер хромосоми] [плече] [номер ділянки] [номер смуги]. Наприклад, 2р12 позначає 2-у хромосому, коротке плече, район 1, смугу 2.
FISH: Кількість сигналів відповідних локусів/центромерних регіонів відповідає кількості даної хромосоми. При відсутності кількісних змін у абортусів жіночої статі визначається два сигнали центромерного регіону статевої хромосоми Х, по два сигнали центромерного регіону хромосом 15,16, по два сигнали відповідних локусів хромосом 13,18,21,22.
При відсутності кількісних змін у абортусів) чоловічої статі визначається по одному сигналу центромерного регіону статевих хромосом Х і Y; по два сигнали центромерного регіону хромосом 15,16, по два сигнали відповідних локусів хромосом 13,18,21,22.
