Лабораторія цитогенетики

Вивчає хромосомний набір людини (каріотип)_, його кількісні (число хромосом) та якісні (структура хромосом) характеристики.

Для більш точної і швидкої ідентифікації окремих хромосом та/або їх конкретних ділянок застосовується метод молекулярно-цитогенетичного дослідження – флуоресцентна in situ гібридизація (FISH) з використанням реагентів відомих виробників (MetaSystems, ZytoVisіоn, Vysis/Abbott).

В лабораторії виконується понад 17 лабораторних досліджень на обладнанні світових брендів – Carl Zeiss, MetaSystems, ESCO, ABBOTT.

Основні напрями діагностики:

• пренатальне та постнатальне каріотипування;
• пренатальне та постнатальне FISH дослідження;
• каріотипування та FISH дослідження для онкогематології.

Дослідження є важливими для:

• подружніх пар, які планують народження дитини;
• подружніх пар, у яких існують репродуктивні проблеми (безпліддя, невиношування вагітності або аномалії розвитку плода);
• сімей з дитиною, у якої наявні вади розвитку (фізичні, розумові, психічні) для уточнення діагнозу та прогнозування подальшої тактики ведення пацієнта;
• онкогематологічних хворих, де аналіз каріотипу та виявлення специфічних маркерів є необхідним для постановки діагнозу, вибору терапії та контролю ефективності лікування.

Пренатальне FISH дослідження проводиться для виявлення найбільш розповсюджених анеуплоїдій при пренатальній діагностиці та в абортивному матеріалі. Лабораторія проводить FISH-аналіз 8-ми хромосом – X, Y, 13, 15, 16, 18, 21, 22.

Постнатальне FISH дослідження використовується

• для верифікації синдромів, пов’язаних із залученням статевих хромосом (Шерешевського-Тернера, Кляйнфельтера, Свайера, Де ля Шапеля, полісомія за Х або Y хромосомою) або із залученням аутосом (синдром Дауна – трисомія 21 хромосоми, Патау – трисомія 13 хромосоми, Едвардса – трисомія 18 хромосоми);
• при онкогематологічних захворюваннях для верифікації діагнозу, прогнозу захворювання, контролю ефективності терапії.

Наявні зонди:

• транслокація t(9;22)(q34.1;q11.2). Перебудова із залученням генів BCR і ABL1 характеризується наявністю т.з. філадельфійської хромосоми – спостерігається у 90-95% пацієнтів з хронічною мієлоїдною лейкемією, (10-30)% дорослих пацієнтів з гострою лімфобластною лейкемією та менше 5% при гострій мієлоїдній лейкемії;
• транслокація (15;17)(q24;q21.2). Перебудова із залученням генів PML і RARA – спостерігається у 95% пацієнтів з гострою промієлоцитарною лейкемією (підтип гострої мієлоїдної лейкемії);
• транслокація t(8;21)(q21.3;q22.1) – спостерігається у 90% пацієнтів з гострою мієлоїдною лейкемією;
• транслокація t(12;21)(p13;q22). Найбільш часто спостерігається при дитячих В-клітинних гострих лімфобластних лейкеміях;
• делеція 17 хромосоми (ген ТР53). Має важливе прогностичне значення при хронічній лімфоцитарній лейкемії, гострій мієлоїдній лейкемії, множинній мієломі;
• делеція 5 хромосоми (ген EGR1) – спостерігається у 40% пацієнтів з мієлодиспластичним синдромом (МДС) або гострою мієлоїдною лейкемією;
• інверсія хромосоми 16 – спостерігається у 10% пацієнтів з гострою мієлоїдною лейкемією;
• транслокації t(4;14) та t(14;16), делеція 1p32.2. Використовуються для прогнозу перебігу множинної мієломи.

Для дослідження використовується біоматеріал:

• Венозна кров у пробірці з гепарином натрію або літію
• Амніотична рідина
• Ворсини хоріону вагітності, що розвивається або завмерлої вагітності
• Кістковий мозок у пробірці з гепарином натрію або літію

Система сканування препаратів для проведення каріотипування: Мікроскоп дослідницького класу AxioImager Z2, Carl Zeiss (Німеччина) та сканер на 8 стекол METAFER з відповідним програмним забезпеченням, MetaSystems (Німеччина).

Лабораторія оснащена автоматизованим обладнанням пошуку метафазних пластин (хромосом) для аналізу каріотипу.

Пошук та фотографування хромосом зі скельця відбуваються автоматично.

Обробка та аналіз зображення - в програмі для каріотипування IKAROS.

Переваги системи сканування:

• швидкий пошук хромосом на препараті (сканування 8 стекол за 2 години);
• можливість знайти та проаналізувати велику кількість хромосом для кожного пацієнта, що дає змогу виявити навіть незначні відхилення від норми;
• вивільнення часу, що затрачено на пошук метафаз на препараті;
• формування зручної бази даних для кожного пацієнта, що дає можливість в любий час передивитися препарати.

Мікроскопи AxioImager A2, Carl Zeiss (Німеччина) для проведення молекулярно-цитогенетичного аналізу (FISH)

Обробка та аналіз зображення проводиться в програмі для FISH-досліджень ISIS

Системний адміністратор - MetaSystems (Німеччина)

Комплект обладнання дозволяє отримати результат з 100% чутливістю і специфічністю.

Інвертований мікроскоп Zeiss Primovert необхідний для контролю росту клітин у поживному середовищі.

Стереомікроскоп Zeiss Stemi 305 використовується для контролю пошуку ворсин хоріону у біологічному зразку завдяки якісній оптиці та подвійній підсвітці.

Бокс біологічної безпеки ESCO Airstream Class II з ULPA-фільтрами високого класу очищення повітря використовується для внесення в стерильних умовах біологічного матеріалу у поживне середовище.

СО2-інкубатор ESCO CellCulture з ULPA-фільтрами та окремим доступом до кожної полки з біоматеріалом створює оптимальні умови для підтримки і росту клітин, що є необхідною умовою для успішного каріотипування.

Всі лабораторні процеси, починаючи із забору біоматеріалу і закінчуючи формуванням бланку результату, відслідковуються завдяки лабораторно-інформаційній системі (ЛІС) та штрих-кодуванню.

Результати досліджень оформляються у вигляді бланків, розроблених фахівцями ДІЛА з урахуванням потреб лікаря й пацієнта, які містять всю необхідну доказову інформацію у зручній наочній формі:

Спеціалісти лабораторії мають кваліфікаційні категорії та приймають участь у програмах перевірки професійного рівня (міжлабораторне порівняння результатів – МПР), які проводить Український Референс-центр з клінічної лабораторної діагностики та метрології НДСЛ «ОХМАТДИТ» МОЗ України.