Діагностичний напрямок
Виявлення генетичних порушень
Загальна характеристика
Каріотипування (Karyotyping) - стандартне цитогенетичне дослідження, яке проводиться з метою виявлення порушень кількості і структури хромосом. Матеріалом для пренатального каріотипування при вагітності, що розвивається, є ворсини хоріона або амніотична рідина.
Каріограма - порядкове подання 46 хромосом (каріотипу), які пофарбовані спеціальним методом G-бендінг (GTG) - забарвлення із застосуванням трипсину і барвника Гімзи (G-смуги - темні) для візуалізації та диференціювання хромосом.
FISH*- метод – молекулярно-цитогенетичний метод, що полягає в реакції гібридизації між штучно створеним ДНК-зондом і комплементарною до нього нуклеотидною послідовністю ядерної ДНК. Аналіз проводиться на інтерфазних ядрах. Перелік хромосом, що виявляться пренатально FISH-методом, включає хромосоми 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y.
* Флуоресцентна in situ гібридизація
Показання для призначення
1. Група високого ризику за результатами комбінованого пренатального скринінгу.
2. Позитивний результат НІПТ.
3. Наявність маркерів хромосомної патології при ультразвуковому обстеженні плода.
4. Підвищений ризик хромосомної патології у плода (в т.ч. наявність збалансованої хромосомної перебудови у батьків).
5. Виключення чи підтвердження хромосомної патології плода.
Маркер
Маркер хромосомних порушень.
Клінічна значущість
Зміни кількості та структури хромосом є причинами хромосомних хвороб.
При обстеженні амніотичної рідини та ворсин хоріону вагітності, що розвивається, каріотипування та FISH-аналіз на 8 хромосом проводиться одночасно.
Використання FISH, 8 хромосом: 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y забезпечує виявлення великого спектру хромосомних аномалій плода (в т. ч. мозаїчні форми) за короткий термін, що є важливим для прийняття зваженого рішення про подальшу тактику. Каріотипування дозволяє оцінити кількість та структуру всіх хромосом.
Склад показників:
Каріотипування
FISH на 8 хромосом: 13, 15, 16, 18, 21, 22, Х та Y
Правила доставки біоматеріалів до лабораторії
біоптат плаценти (хоріон)
Біоматеріал для дослідження: Ворсинки хоріона. Тип пробірки, об’єм БМ в пробірці: Стерильний контейнер з кришкою / NaCl 0,9%. Умови доставки: Температура від 4 до 8 градусів, 24 год. Коментар: доставка 24 год у транспортному середовищі NCl 0,9% або 48 год з додаванням гепарину до NCl0,9% у співвідношенні 1:100.
Інтерференція:
• Не виявлено.
• Не виявлено.
Інтерпретація:
Інтерпретація результатів виконується лікарем-генетиком.
Каріотипування: 46, ХХ - нормальний жіночий каріотип, 46, XY - нормальний чоловічий каріотип. Для уніфікації цитогенетичних досліджень розроблена Міжнародна цитогенетична номенклатура хромосом людини (ISCN, 1978), заснована на диференціальному фарбуванні хромосом по довжині. Ця номенклатура дозволяє докладно описати кожну хромосому: її порядковий номер, плече (р - коротке плече, q - довге плече) район, смугу і навіть субполосу. [номер хромосоми] [плече] [номер ділянки] [номер смуги]. Наприклад, 2р12 позначає 2-у хромосому, коротке плече, район 1, смугу 2.
FISH: Кількість сигналів відповідних локусів/центромерних регіонів відповідає кількості даної хромосоми. При відсутності кількісних змін у плодів жіночої статі визначається два сигнали центромерного регіону статевої хромосоми Х, по два сигнали центромерного регіону хромосом 15,16, по два сигнали відповідних локусів хромосом 13,18,21,22.
При відсутності кількісних змін у плодів чоловічої статі визначається по одному сигналу центромерного регіону статевих хромосом Х і Y; по два сигнали центромерного регіону хромосом 15,16, по два сигнали відповідних локусів хромосом 13,18,21,22.
