Субпопуляции лимфоцитов крови

Общая характеристика

Данное исследование позволяет охарактеризовать лимфоцитарное звено клеточного иммунитета: процентное соотношение основных субпопуляций, их абсолютное количество в крови, а также уровень активации. Лимфоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. Физиологическая роль их может быть различной. Эти структуры являются мишенями при иммунофенотипировании лимфоцитов как антигенные маркёры различных субпопуляций, присутствие которых определяют с помощью меченых моноклональных антител. Поверхностные антигенные структуры на клетках, выявляемые моноклональными антителами, назвали кластерами дифференциации (CD, clusters of differentiation). Кластерам дифференциации в целях стандартизации присвоены определённые номера. Используя флюорохром-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определёнными CD, можно произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям. Это позволяет понять природу некоторых заболеваний, оценить состояние пациента, следить за течением и прогнозировать дальнейшее развитие заболевания.
Основные субпопуляции лимфоцитов:
Т-лимфоциты – лимфоциты, созревание которых происходит в тимусе. Они участвуют в обеспечении клеточного иммунного ответа и контролируют работу В-лимфоцитов, ответственных за образование антител, т. е. за гуморальный иммунный ответ.
Т-хелперы – разновидность Т-лимфоцитов, несут на своей поверхности структуры, способствующие распознаванию антигенов, презентированных вспомогательными клетками, участвуют в регуляции иммунного ответа, вырабатывая различные цитокины.
Цитотоксические Т-клетки - распознают фрагменты антигена на поверхности клеток-мишеней, ориентируют свои гранулы по направлению к мишени и высвобождают их содержимое в области контакта с ней. При этом некоторые цитокины являются сигналом гибели (по типу апоптоза) для клеток-мишеней.
В-лимфоциты - проходят развитие в лимфоузлах и других периферических органах лимфоидной системы. На поверхности эти клетки несут иммуноглобулины, функционирующие как рецепторы к антигенам. В ответ на взаимодействие с антигеном В-лимфоциты отвечают делением и дифференциацией в плазматические клетки, вырабатывающие антитела, посредством которых обеспечивается гуморальный иммунитет.
ЕК-клетки (естественные киллерные клетки, или натуральные киллеры) – клетки с естественной, неиммунной цитотоксической активностью к неопластически изменённым клеткам-мишеням. ЕК-клетки не относятся ни к зрелым Т- или В-лимфоцитам, ни к моноцитам.
Кластеры дифференциации антигенов:
CD3 – поверхностный маркёр, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. По функциям относится к семейству белков, формирующих комплекс мембранной передачи сигнала, связанный с Т-клеточным рецептором.
CD4 – характерен для хелперных Т-клеток; представлен также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Он связывается с молекулами MHC класса II, экспрессированными на антигенпрезентирующих клетках, облегчая распознавание пептидных антигенов.
CD8 – характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, ЕК-клеток, большей части тимоцитов. Это рецептор Т-клеточной активации, который облегчает распознавание клеточно-связанных антигенов MHC класса I (major histocompatibility complex - главный комплекс гистосовместимости).
CD16 – используется вместе с CD56 преимущественно для идентификации ЕК-клеток. Представлен также на макрофагах, тучных клетках, нейтрофилах, некоторых Т-клетках. Это компонент рецепторов, связанных с IgG, опосредующих фагоцитоз, продукцию цитокинов и антителозависимую клеточную цитотоксичность.
CD56 – прототипный маркёр ЕК-клеток. Помимо ЕК-клеток присутствует на эмбриональных, мышечных, нервных, эпителиальных клетках, некоторых активированных Т-клетках. CD56-позитивны такие гематологические опухоли, как ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, анапластическая крупноклеточная лимфома, плазмоклеточная миелома (плазмоклеточная лейкемия CD56-негативна). Это молекулы адгезии клеточной поверхности, которые облегчают гомофильную адгезию и участвуют в контактном ингибировании роста, ЕК-клеточной цитотоксичности, развитии нервных клеток.

Показания для назначения

1. Рецидивирующие инфекции, инфекционные заболевания с хроническим и затяжным течением.
2. Подозрение на генетически обусловленный или приобретённый иммунодефицит.
3. Аутоиммунные заболевания.
4. Аллергические заболевания.
5. Контроль терапии цитостатиками, иммунодепрессантами и иммуномодуляторами.

Маркер

Маркер выявления первичного или вторичного иммунодефицита и контроль проведения иммуностимулирующей терапии.

Клиническая значимость

Правила подготовки пациента

Правила доставки биоматериалов в лабораторию

Интерференция:

• см. комплексную иммунограмму
• см. комплексную иммунограмму

Интерпретация:

• Количество Т-лимфоцитов (CD3+) Снижение относительного и абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует об ослаблении защитных сил организма и развитии гипоиммунного состояния или иммунодефицита. Снижение Т-лимфоцитов до 0,7х109 позволяет предположить, а до 0,5х109 – поставить диагноз иммунодефицит. В этом случае следует также обратить внимание на другие лабораторные показатели, а именно наличие CD4 лимфопении, vCD4/CD8 (<0,9–подозрение на иммунодефицит, <0,3– иммунодефицит). Однако vТ-лимфоцитов до 0,7х109, а Т-хелперных клеток до 0,4х109 при отсутствии соответствующей клинической картины могут быть  транзиторными и обратимыми, развиваться как вторичные.
  Количество  Т-хелперов (CD3+CD4+)vснижено при следующих заболеваниях:
  • ВИЧ-инфекция.
  • Вирусные инфекции (корь, гепатиты, цитомегаловирусная инфекция, краснуха, инфекции, вызванные вирусом Эпштейн-Барр).
  • Бактериальные инфекции (стафилококковая инфекция, туберкулез, лепра, кокцидиомикоз, аспергиллез и др.).
  • Воздействие химических веществ с лимфотоксическим действием.
  • Воздействие ионизирующей радиации.
  • Старение.
  • Лечение цитостатиками, кортикостероидами.
  • Отравления тяжелыми металлами, пестицидами, в т.ч. диоксином.
  • Болезни метаболизма (диабет, синдром Иценко-Кушинга, дисфункция паращитовидных желез).
  • Голодание или дефицит в диете жизненно-важных компонентов.
  • Парапротеинемии.
  • Ожоговая болезнь.
  • Сразу после тяжелой физической нагрузки (у спортсменов).
  • СХУ (синдром хронической усталости).
  Количество  Т-цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+)v снижение  количества Т-цитотоксических лимфоцитов, сопровождающееся снижением Т-хелперных лимфоцитов и соотношения CD4/CD8, указывает на возможность развития или наличия аутоиммунного процесса, либо хронической вирусной инфекции. Параллельное снижение цитотоксических клеток и натуральных киллеров наблюдается при ряде солидных опухолей. Количество В-лимфоцитов (CD19+)vснижение при таких состояниях как:
  • Врожденная гипогаммаглобулинемия или агаммаглобулинемия.
  • Воздействие ионизирующей радиации.
  • После удаления селезенки.
  • Лечение цитостатиками, иммунодепрессантами.
  • Отравление тяжелыми металлами, пестицидами.
  • Острая вирусная инфекция.
  • Хроническая бактериальная инфекция.
  Снижение относительного количества В-лимфоцитов у мальчиков до 3% и ниже, сопровождающееся агаммаглобулинемией, свидетельствует о наличии врожденного иммунодефицита - Х-сцепленной агаммаглобулинемии (с-м Бруттона).
  Снижение уровня В-лимфоцитов у детей младшего возраста обоих полов может наблюдаться также при другом врожденном иммунодефиците - транзиторной младенческой гипогаммаглобулинемии.
  Количество NK-клеток (CD3-СD16/56+)vснижение относительного количества Т-лимфоцитов параллельно со снижением В-лимфоцитов (CD19+) и натуральных киллеров (CD16/56+) является наиболее характерным для пациентов, длительное время получающих иммуносупрессивную терапию (кортикостероиды), но могут наблюдаться и у части взрослых здоровых лиц.
  Параллельное снижение Т- цитотоксических клеток и натуральных киллеров наблюдается при ряде солидных опухолей. В этом случае определение лимфоцитарных субпопуляций в динамике может быть использовано в качестве одного из мониторинговых тестов проводимого лечения.
  Причины снижения числа NK-клеток:
  • Первичные ИД: агаммаглобулинемия без В-лимфоцитов (сцепленная с полом), гипер-IgM-синдром.
  • Облучение.
  • Лечение кортикостероидами и другими иммунодепрессантами.
  • Состояния после удаления селезенки.
  • Лечение цитостатиками.
  • СПИД.
  • Паразитарные заболевания.
  • Системные заболевания.
  • Дефицит цинка.