Комплекс №291 "Пап-тест с иммуноцитохимией р16, Ki-67 (одобрено FDA)"

Общая характеристика

Пап-тест — один из методов скрининга рака шейки матки. Согласно стандарту медицинской помощи «Скрининг рака шейки матки. Ведение пациенток с аномальными результатами скрининга и предраковыми состояниями шейки матки», стратегии цервикального скрининга включают либо первичный скрининг на вирус папилломы человека (ВПЧ), либо цитологическое исследование шейки матки (ЦДШМ). Для рутинного скрининга РШМ при информированном согласии пациентки проводится ЦДШМ каждые 3 года у женщин в возрасте 21–65 лет или первичное тестирование на ВПЧ с генотипированием (для определения ВПЧ высокого онкогенного риска) каждые 5 лет в возрасте от 25 до 65 лет.
Пап-тест методом жидкостной цитологии (технология SurePath BD) — современная и наиболее эффективная автоматизированная методика, рекомендованная FDA (США) и директивами СЕ. По сравнению с традиционной цитологией Пап-тест методом жидкостной цитологии (технология SurePath BD) позволяет:
• увеличить на 64,4% выявление HSIL (дисплазий средней и тяжелой степени поражения) и на 107% уровень выявления LSIL (дисплазий легкой степени)
• снизить на 58% количество неудовлетворительных цитологических препаратов
• улучшить на 75% дифференцировку процессов воспаления и слабо выраженной дисплазии (ASCUS)
• при одномоментном заборе биологического материала провести 2 исследования: цитологическое и выявление ДНК ВПЧ.

Иммуноцитохимия (ИЦХ) — это лабораторный метод качественного выявления специфических белков в цитологических препаратах с помощью реакции антиген-антитело. В контексте скрининга рака шейки матки набор CINtec PLUS Cytology Kit использует коктейль первичных моноклональных антител для одновременного выявления двух биомаркеров в клетках эпителия шейки матки:
• p16INK4a: белок, который регулирует клеточный цикл. Его чрезмерная экспрессия является суррогатным маркером трансформирующей инфекции вирусом папилломы человека (ВПЧ).
• Ki-67: маркер клеточной пролиферации (деления), который обычно отсутствует в клетках, находящихся в состоянии покоя (G0).
Метод основан на ферментативном превращении хромогенов, что позволяет визуально идентифицировать белки под световым микроскопом:
• p16INK4a выявляется в виде коричневого осадка (хромоген DAB) в цитоплазме и/или ядре клетки.
• Ki-67 выявляется в виде красного осадка (хромоген Fast Red) исключительно в ядре.
Система CINtec PLUS предназначена для диагностики in vitro (IVD) и одобрена для использования как вспомогательное средство в скрининге. Она оптимизирована для работы на автоматизированных инструментах серии BenchMark IHC/ISH (GX, XT, ULTRA, ULTRA PLUS).
Цитологический тест CINtec® PLUS — это качественный иммуноцитохимический анализ, одобренный FDA для использования с образцами цитологии шейки матки, собранными медицинским работником. Оценка микропрепаратов (стекол), окрашенных с помощью набора CINtec PLUS Cytology Kit, должна проводиться исключительно сертифицированным специалистом, который прошел соответствующее обучение по интерпретации результатов этих тестов.

Оценка ИЦХ CINtec PLUS Cytology сертифицированным специалистом

В Recommendations for Use of p16/Ki67 Dual Stain for Management of Individuals Testing Positive for Human Papillomavirus MeganClarke, 2024 рекомендовано применять как вспомогательный инструмент для триажа (сортировки) пациентов в следующих клинических ситуациях:

В Recommendations for Use of p16/Ki67 Dual Stain for Management of Individuals Testing Positive for Human Papillomavirus MeganClarke, 2024 рекомендовано применять как вспомогательный инструмент для триажа (сортировки) пациентов в следующих клинических ситуациях:

1. Сортировка ВПЧ-положительных результатов

Это основное назначение теста, одобренное FDA.

Его применяют для определения дальнейшей тактики у женщин, которые имеют положительный результат ВПЧ высокого риска, полученный во время:

• Первичного ВПЧ-скрининга (когда ВПЧ-тест является первым этапом обследования).

• Ко-тестирования (одновременное проведение ПАП-теста и ВПЧ-теста).

• Ситуаций, когда ограниченное генотипирование ВПЧ (определение типов 16 и 18) недоступно или не проводилось.

2. Сортировка аномальных результатов ПАП-теста

Иммуноцитохимия используется для уточнения риска у пациенток с сомнительными результатами традиционной цитологии:

• ASC-US (клетки плоского эпителия неопределенного значения).

• LSIL (плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени).

• Ситуации, когда ПАП-тест отрицательный (NILM), но ВПЧ-тест положительный.

3. Дальнейшее наблюдение

Тест может быть применен в процессе мониторинга пациенток после:

• Получения аномальных результатов предыдущего скрининга.

• Проведения кольпоскопии, если она не выявила CIN2+.

• Проведенного лечения предраковых состояний шейки матки для оценки его эффективности и риска рецидива.

Однако для последней категории нет достаточно данных относительно эффективности.

4. Сценарии с учетом генотипа ВПЧ

В соответствии с рекомендациями ASCCP и рабочей группы Enduring Guidelines:

• Для ВПЧ 16/18: Хотя иммуноцитохимическое исследование может быть полезным, пациентки с этими типами ВПЧ часто подлежат немедленной кольпоскопии независимо от результата ИЦХ из-за их сверхвысокого онкогенного риска.

• Для других 12 типов ВПЧ высокого риска: Положительный результат ИЦХ является прямым основанием для направления на кольпоскопию, тогда как отрицательный результат позволяет безопасно отложить повторное обследование на 1 год.

ИЦХ p16Кi67 НЕ рекомендуется:

• Как самостоятельный (первичный) скрининговый тест без предварительного ВПЧ-теста или цитологии.

• Для пациентов с отрицательным результатом на ВПЧ.

• В случаях, когда цитология уже выявила серьезные изменения, такие как HSIL, ASC-H или AGC, поскольку они требуют немедленной кольпоскопии без дополнительной сортировки.

Факторы, которые негативно влияют на качество образца клеток шейки матки:

Менструация, аномальное маточное кровотечение;

Воспалительные заболевания влагалища и шейки матки;

Половой акт в течение 24 часов до забора образца;

Выраженный генитоуринарный синдром;

Беременность, послеродовой период и период лактации;

Физикальные манипуляции или химические раздражения такие как: предварительное пальцевое исследование влагалища, дезинфицирующий крем или раствор, лубрикант, вагинальные лекарственные средства, вагинальные спринцевания или спермицидный гель (менее чем за 24 часа до этого), предыдущая кольпоскопия с уксусной кислотой (менее чем за 24 часа до этого), предыдущее цитологическое исследование шейки матки (менее чем за 3 недели до этого); хирургическое вмешательство на шейке матки (менее чем за 3 месяца до этого); лучевая терапия.

Показания для назначения

Пап-тест является частью стратегии скрининга рака шейки матки и ведения пациенток с аномальными результатами скрининга и патологией шейки матки в соответствии со стандартом медицинской помощи «Скрининг рака шейки матки. Ведение пациенток с аномальными результатами скрининга и предраковыми состояниями шейки матки» ГС 2024-1057 от 18.06.2024.
В марте 2020 года Управление по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами США (FDA) одобрило использование иммуноцитохимии p16INK4a/Ki-67 для цитологического исследования (коммерчески доступного в США как CINtec PLUS Cytology [Roche Diagnostics]) для сортировки с целью определения тактики ведения пациентов с положительными результатами на ВПЧ, полученными во время первичного ВПЧ-скрининга или ко-тестирования.
• сортировка* ВПЧ-положительных результатов, когда скрининговый тест предоставляет ограниченное генотипирование**.
• сортировка ВПЧ-положительных результатов в сочетании с цитологией (ко-тест)
• сортировка ВПЧ-положительных результатов во время наблюдения после аномальных результатов скрининга, кольпоскопии и лечения.
*Сортировка — это применение дополнительных исследований после первичного скрининга (например, Пап-теста или первичного ВПЧ-скрининга), с целью отбора женщин с повышенным риском злокачественной патологии шейки матки для дальнейшего обследования/лечения.
**Термин «ограниченное генотипирование» означает одобренные FDA тесты первичного скрининга, которые отдельно идентифицируют 16 и 18 типы, а остальные типы определяются без идентификации.

Маркер

Комплекс сочетает маркеры цито-морфологических изменений в эпителии шейки матки и трансформирующей ВПЧ-инфекции

Клиническая значимость

В состав комплекса входят:

• Пап-тест методом жидкостной цитологии (технология SurePath BD)
• Иммуноцитохимия р16, Ki-67 (CINtec PLUS Cytology, одобрено FDA)

Правила подготовки

Правила доставки биоматериалов в лабораторию