Иммуноцитохимия р16, Ki-67 (CINtec PLUS Cytology, одобрено FDA)

Общая характеристика

Важно! Чтобы сделать назначение на иммуноцитохимию, необходимо позвонить по номеру 0 800 217 887 и указать номер предыдущего Пап-теста методом жидкостной цитологии (технология SurePath BD) или ВПЧ, 14 генотипов, одобренный FDA, с идентификацией типов 16, 18 – качественный/Комплекс №277 "Высокочувствительный скрининг рака шейки матки, одобренный FDA"/Комплекс №62 "Цитологический скрининг рака шейки матки с оценкой вагинальных выделений", выполненного в ДІЛА в течение последних 30 дней.

Иммуноцитохимия (ИЦХ) — это лабораторный метод качественного выявления специфических белков в цитологических препаратах с помощью реакции антиген-антитело. В контексте скрининга рака шейки матки набор CINtec PLUS Cytology Kit использует коктейль первичных моноклональных антител для одновременного выявления двух биомаркеров в клетках эпителия шейки матки:
• p16INK4a: белок, который регулирует клеточный цикл. Его чрезмерная экспрессия является суррогатным маркером трансформирующей инфекции вирусом папилломы человека (ВПЧ).
• Ki-67: маркер клеточной пролиферации (деления), который обычно отсутствует в клетках, находящихся в состоянии покоя (G0).
Метод основан на ферментативном превращении хромогенов, что позволяет визуально идентифицировать белки под световым микроскопом:
• p16INK4a выявляется в виде коричневого осадка (хромоген DAB) в цитоплазме и/или ядре клетки.
• Ki-67 выявляется в виде красного осадка (хромоген Fast Red) исключительно в ядре.
Система CINtec PLUS предназначена для диагностики in vitro (IVD) и одобрена для использования как вспомогательное средство в скрининге. Она оптимизирована для работы на автоматизированных инструментах серии BenchMark IHC/ISH (GX, XT, ULTRA, ULTRA PLUS).
Цитологический тест CINtec® PLUS — это качественный иммуноцитохимический анализ, одобренный FDA для использования с образцами цитологии шейки матки, собранными медицинским работником. Оценка микропрепаратов (стекол), окрашенных с помощью набора CINtec PLUS Cytology Kit, должна проводиться исключительно сертифицированным специалистом, который прошел соответствующее обучение по интерпретации результатов этих тестов.

Оценка ИЦХ CINtec PLUS Cytology сертифицированным специалистом

В Recommendations for Use of p16/Ki67 Dual Stain for Management of Individuals Testing Positive for Human Papillomavirus MeganClarke, 2024 рекомендовано применять как вспомогательный инструмент для триажа (сортировки) пациентов в следующих клинических ситуациях:

1. Сортировка ВПЧ-положительных результатов

Это основное назначение теста, одобренное FDA.

Его применяют для определения дальнейшей тактики у женщин, которые имеют положительный результат ВПЧ высокого риска, полученный во время:

• Первичного ВПЧ-скрининга (когда ВПЧ-тест является первым этапом обследования).

• Ко-тестирования (одновременное проведение ПАП-теста и ВПЧ-теста).

• Ситуаций, когда ограниченное генотипирование ВПЧ (определение типов 16 и 18) недоступно или не проводилось.

2. Сортировка аномальных результатов ПАП-теста

Иммуноцитохимия используется для уточнения риска у пациенток с сомнительными результатами традиционной цитологии:

• ASC-US (клетки плоского эпителия неопределенного значения).

• LSIL (плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени).

• Ситуации, когда ПАП-тест отрицательный (NILM), но ВПЧ-тест положительный.

3. Дальнейшее наблюдение

Тест может быть применен в процессе мониторинга пациенток после:

• Получения аномальных результатов предыдущего скрининга.

• Проведения кольпоскопии, если она не выявила CIN2+.

• Проведенного лечения предраковых состояний шейки матки для оценки его эффективности и риска рецидива.

Однако для последней категории нет достаточно данных относительно эффективности.

4. Сценарии с учетом генотипа ВПЧ

В соответствии с рекомендациями ASCCP и рабочей группы Enduring Guidelines:

• Для ВПЧ 16/18: Хотя иммуноцитохимическое исследование может быть полезным, пациентки с этими типами ВПЧ часто подлежат немедленной кольпоскопии независимо от результата ИЦХ из-за их сверхвысокого онкогенного риска.

• Для других 12 типов ВПЧ высокого риска: Положительный результат ИЦХ является прямым основанием для направления на кольпоскопию, тогда как отрицательный результат позволяет безопасно отложить повторное обследование на 1 год.

ИЦХ p16Кi67 НЕ рекомендуется:

• Как самостоятельный (первичный) скрининговый тест без предварительного ВПЧ-теста или цитологии.

• Для пациентов с отрицательным результатом на ВПЧ.

• В случаях, когда цитология уже выявила серьезные изменения, такие как HSIL, ASC-H или AGC, поскольку они требуют немедленной кольпоскопии без дополнительной сортировки.

Факторы, которые негативно влияют на качество образца клеток шейки матки:

Менструация, аномальное маточное кровотечение;

Воспалительные заболевания влагалища и шейки матки;

Половой акт в течение 24 часов до забора образца;

Выраженный генитоуринарный синдром;

Беременность, послеродовой период и период лактации;

Физикальные манипуляции или химические раздражения такие как: предварительное пальцевое исследование влагалища, дезинфицирующий крем или раствор, лубрикант, вагинальные лекарственные средства, вагинальные спринцевания или спермицидный гель (менее чем за 24 часа до этого), предыдущая кольпоскопия с уксусной кислотой (менее чем за 24 часа до этого), предыдущее цитологическое исследование шейки матки (менее чем за 3 недели до этого); хирургическое вмешательство на шейке матки (менее чем за 3 месяца до этого); лучевая терапия.

Показания для назначения

В марте 2020 года Управление по контролю за продуктами питания и лекарственными средствами США (FDA) одобрило использование иммуноцитохимии p16INK4a/Ki-67 для цитологического исследования (коммерчески доступного в США как CINtec PLUS Cytology [Roche Diagnostics]) для сортировки с целью определения тактики ведения пациентов с положительными результатами на ВПЧ, полученными во время первичного ВПЧ-скрининга или ко-тестирования.
• сортировка* ВПЧ-положительных результатов, когда скрининговый тест предоставляет ограниченное генотипирование**.
• сортировка ВПЧ-положительных результатов в сочетании с цитологией (ко-тест)
• сортировка ВПЧ-положительных результатов во время наблюдения после аномальных результатов скрининга, кольпоскопии и лечения.
*Сортировка — это применение дополнительных исследований после первичного скрининга (например, Пап-теста или первичного ВПЧ-скрининга), с целью отбора женщин с повышенным риском злокачественной патологии шейки матки для дальнейшего обследования/лечения.
**Термин «ограниченное генотипирование» означает одобренные FDA тесты первичного скрининга, которые отдельно идентифицируют 16 и 18 типы, а остальные типы определяются без идентификации.

Маркер

Маркер трансформирующей ВПЧ-инфекции

Клиническая значимость

Правила подготовки