Общая характеристика
Инфекция, вызванная Clostridioides difficile (CDI), является одной из наиболее распространенных причин антибиотико-ассоциированной диареи и нозокомиальных инфекций. Заболевание может варьировать от легкой водянистой диареи до тяжелого псевдомембранозного колита, токсического мегаколона, сепсиса и смерти. Основным фактором вирулентности есть продукция токсинов А и В токсигенными штаммами бактерии.
Распространенность
•C. difficile является ведущей причиной госпитальной инфекционной диареи;
• Наивысший риск имеют пациенты после антибиотикотерапии, госпитализации, старше 65 лет и иммуноскомпрометированные пациенты;
• В последние годы растет количество случаев внебольничной CDI, даже среди лиц без классических факторов риска.
Почему это исследование важно?
Основной причиной развития CDI является нарушение нормальной кишечной микробиоты, чаще всего после применения антибиотиков. В этих условиях C. difficile активно размножается, а токсигенные штаммы начинают продуцировать токсины А и В, повреждающие слизистую толстой кишки.
Сложность диагностики состоит в том, что:
• носительство C. difficile может быть бессимптомным;
•не все штаммы продуцируют токсины;
• только обнаружение бактерии не всегда означает наличие заболевания.
Поэтому одновременное определение GDH и токсинов А и В значительно повышает клиническую информативность исследования.
Не рекомендуется тестировать сформированный кал или бессимптомных носителей в соответствии с международными рекомендациями. Glutamate Dehydrogenase and Toxin A/B https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9145049/
Тест не назначается:
•Детям до 1 года в связи с высоким процентом ложноположительных результатов в этой возрастной группе;
•Для контроля эффективности лечения, так как у некоторых пациентов еще длительное время после клинического выздоровления в кале обнаруживается токсин C.difficilе.
Показания для назначения
Исследование рекомендовано пациентам при наличии:
1.Острой диареи (≥3 неоформленных стула в течение 24 часов);
2.Диареи, ассоциированной с приемом антибактериальных препаратов, особенно у пациентов пожилого возраста и лиц с сопутствующими хроническими заболеваниями;
3. на нозокомиальную инфекцию кишечника, связанную с C. difficile;
4.Клинического подозрения на клостридиальную инфекцию или псевдомембранозный колит;
5.Рецидива диареи после ранее перенесенной инфекции, вызванной C. difficile;
6.Иммуносупрессивных состояний (в том числе на фоне противоопухолевой терапии, трансплантации, приема иммуносупрессантов) или онкогематологических заболеваний, сопровождающихся диареей;
Маркер
Тест одновременно определяет три маркера:
1. Глутаматдегидрогеназа (GDH)
GDH — фермент, синтезирующий все штаммы C. difficile, как токсигенные, так и нетоксигенные.
Обнаружение GDH свидетельствует о присутствии бактерии в кале, но не подтверждает продукцию токсинов.
2. Токсин А
Энтеротоксин, вызывающий:
•секрецию жидкости;
•воспаление;
•повреждение слизистой.
3. Токсин В
Цитотоксин, который сегодня считается основным фактором вирулентности большинства клинически значимых штаммов.
Клиническая значимость
Исследование позволяет:
•быстро оценить вероятность CDI;
•дифференцировать возможное бессимптомное носительство от токсигенной инфекции;
•определить необходимость дальнейшего подтверждающего тестирования методом ПЦР;
•способствовать своевременному установлению диагноза и выбору оптимальной тактики лечения;
•обеспечить рациональное использование лабораторных методов диагностики в соответствии с современными клиническими рекомендациями.
Состав показателей:
Глутаматдегідрогеназа
Референтные значения:
Токсин А
Референтные значения:
Токсин В
Референтные значения:
Правила подготовки
кал
Правила доставки биоматериалов в лабораторию
кал
Биоматериал для исследования: кал. Тип пробирки, объем БМ в пробирке: Контейнер для сбора биоматериала. ПреА обработка перед транспортировкой: хранить в холодильнике. Условия доставки: Температура от 18 до 25 градусов, 2 ч.
Биоматериал для исследования: кал. Тип пробирки, объем БМ в пробирке: Контейнер для сбора биоматериала. ПреА обработка перед транспортировкой: хранить в холодильнике. Условия доставки: Температура от 2 до 8 градусов, 24 ч.
Интерференция:
Інтерферуючі сполуки НЕ впливають на результат до концентрації Аскорбінова кислота < 20 мг/дл Щавлева кислота < 60 мг/дл Білірубін < 100 мг/дл Сечова кислота < 60 мг/дл Аспірин < 20 мг/дл Сечовина < 2000 мг/дл Глюкоза < 2000 мг/дл Кофеїн < 40 мг/дл Альбумін < 2000 мг/дл На результат могут влиять:
•недостаточное количество кала;
•неоднородность образца;
•длительное хранение при комнатной температуре;
•многократное замораживание/размораживание;
•использование сформированного кала;
•исследование без клинических симптомов;
низкая концентрация токсинов на ранних или поздних стадиях инфекции.
Интерпретация:
Интерпретацией результата должен заниматься квалифицированный специалист, четко понимающий преимущества и ограничения теста в контексте всех клинико-анамнестических данных. Неправильное использование теста может увеличить вероятность постановки ошибочного диагноза и привести к ненужным вмешательствам и снижению качества жизни пациента.
GDH – высокочувствительный маркер присутствия C. difficile, но не позволяет отличить токсигенные штаммы от нетоксигенных.
Токсин А свидетельствует о продукции энтеротоксина и поддерживает диагноз активной инфекции при соответствующей клинической картине.
Токсин В является основным фактором вирулентности большинства современных клинических штаммов C. difficile и имеет решающее значение в развитии повреждения слизистой толстой кишки. Существуют клинически значимые штаммы A-/B+, тогда как штаммы A+/B- встречаются значительно реже.
Одновременное выявление GDH и токсинов А/В имеет высокую диагностическую ценность и позволяет быстро идентифицировать пациентов с высокой вероятностью активного CDI.
Отрицательный результат не исключает инфекцию полностью, если клиническое подозрение остается высоким. В таких случаях рекомендуется применять двух- или трехэтапный алгоритм диагностики (в частности ПЦР) в соответствии с рекомендациями IDSA/SHEA и ESCMID.Результат Клінічна інтерпретація GDH (-), токсин А (-), токсин В (-) C. difficile не виявлено або концентрація антигену і токсинів нижча за межу чутливості тесту. За високої клінічної підозри на CDI доцільно розглянути повторне дослідження або застосування методу ПЛР GDH (+), токсин А (-), токсин В (-) Виявлено C. difficile, однак токсини не визначаються. Можливі безсимптомне носійство, нетоксигенний штам або низький рівень продукції токсинів. Рекомендується інтерпретувати результат з урахуванням клінічної картини та, за потреби, підтвердити методом ПЛР GDH (+), токсин А (+), токсин В (-) Виявлено токсигенний штам C. difficile, який продукує токсин А. За наявності клінічних симптомів результат свідчить на користь активної клостридіальної інфекції (CDI) GDH (+), токсин А (-), токсин В (+) Виявлено токсигенний штам C. difficile, що продукує токсин В. Більшість сучасних клінічно значущих штамів продукують саме токсин В, який вважається основним фактором вірулентності. За наявності клінічних проявів результат свідчить на користь CDI GDH (+), токсин А (+), токсин В (+) Виявлено C. difficile та обидва основні токсини. У поєднанні з клінічними симптомами результат підтверджує високу ймовірність активної токсигенної інфекції C. difficile GDH (-), токсин А (+) або токсин В (+) Нетиповий (дискордантний) результат. Може бути пов'язаний з дуже низькою концентрацією GDH, аналітичними особливостями або рідкісними причинами. Рекомендується повторне дослідження та/або підтвердження методом ПЛР
