Зонулин (кал, количественное определение)

Общая характеристика

Определение уровня зонулина в кале является современным неинвазивным методом оценки функциональной целостности кишечного барьера. 

Главным структурным элементом, регулирующим избирательность кишечного барьера, являются плотные контакты (tight junctions или zonula occludens) — специализированные белковые комплексы, прочно соединяющие соседние клетки-энтероциты, контролируя которые могут проходить через стенку кишечника, а что — нет.
Зонулин – это белок (модулятор), который обратно разрушает плотные контакты (tight junctions, или zonula occludens) между энтероцитами. Его избыточный секреторный выброс приводит к расширению межклеточных промежутков и развитию синдрома повышенной кишечной проницаемости (так называемого leaky gut syndrome, синдром дырявого кишечника).
Через образовавшиеся «щели» в подслизистый слой и системный кровоток проникают большие молекулы: фрагменты непереваренной пищи, липополисахариды (ЛПС) бактериальных стенок, токсины и антигены. Следствием этого становится персистирующее воспаление, системная иммунная активация и появление стойких гастроинтестин.
Наиболее мощными стимуляторами секреции зонинулина есть фрагменты глютена (глиадин) и бактериальный избыточный рост (дисбиоз кишечника, СНБР).
Зонулин является функциональным, а не нозологическим маркером. Он указывает на наличие патологического процесса (барьерной дисфункции) и не является специфическим для одного конкретного заболевания, поэтому оценивается в комплексе с другими тестами (например, с фекальным кальпротектином для дифференциации воспаления).
Фекальный зонулин рассматривается как:
•дополнительный функциональный маркер кишечного барьера
•потенциальный индикатор повышенной проницаемости кишечника
•вспомогательный тест в комплексной оценке гастроэнтерологических и аутоиммунных состояний
Количественное определение в кале методом ИФА (ELISA) позволяет оценить степень повреждения эпителиального слоя слизистой.
Определение маркера чаще всего производится в рамках комплексной диагностики следующих состояний:
•Целиакия (обладает наивысшим уровнем доказательности — глиадин непосредственно стимулирует выброс зонинулина, запускающий аутоиммунный каскад и поддерживающий деструкцию ворсинок);
•Синдром раздраженного кишечника (СПК, особенно диарейный тип).

Показания для назначения

1.Дифференциальная диагностика функциональных расстройств ЖКТ и верификация чувствительности к глютену без целиакии (NCGS). Подозрение на СПК или NCGS, когда у пациента хронические вздутия, диарея или боль более 3 месяцев, а рутинные исследования (ЗАК, СРБ, кальпротектин/лактоферрин и колоноскопия с биопсией) абсолютно в норме. Тест подтвердит, что причина симптомов – повышенная проницаемость кишечного барьера.

2.Оценка комплаенса и регенерации при целиакии: через 3–6 месяцев безглютеновой диеты с целью контроля лечения. Если пациент на агглютеновой диете, а зонулин в кале остается высоким – вероятно, он употребляет «скрытый глютен» (например, в соусах или полуфабрикатах).

3.Оценка структурных последствий СНБР (синдрома избыточного бактериального роста) и глубокого дисбиоза: исследование покажет, успели ли бактерии и их токсины (ЛПС) повредить межклеточные контакты и вызвать энтеропатию.

4. Скрининг рисков и предупреждение обострений при системной аутоиммунной патологии. Пациентам с аутоиммунными болезнями (сахарный диабет 1 типа, тиреоидит Хашимото, ревматоидный артрит) при появлении любых жалоб на нарушение пищеварения. Нарушенный кишечный барьер пропускает макромолекулы и токсины в кровоток, провоцируя системное воспаление.

5.Диагностика НПВП-индуцированной энтеропатии: скрининг повреждения слизистой кишечника у пациентов, которые находятся на длительной терапии нестероидными противовоспалительными препаратами или кортикостероидами.

6.Объективный контроль терапии и заживления слизистой. Пациентам, проходящим курс лечения синдрома повышенной кишечной проницаемости. Сравнительный анализ уровня зонинулина «до» и «после» окончания курса терапии с применением мукопротекторов, аминокислот (L-глутамин), пробиотиков (оптимально через 8–12 недель).

Маркер

Зонулин является главным биохимическим маркером проницаемости кишечного барьера (синдрома «дырявой кишки»). На молекулярном уровне это белок, модулирующий проницаемость плотных контактов (tight junctions) между эпителиальными клетками слизистой кишечника.

Повышение концентрации фекального зонинулина свидетельствует о разрушении архитектоники плотных контактов (tight junctions) между энтероцитами и является важным диагностическим маркером в верификации таких патологий, как:

-целиакия и непереносимость глютена без целиакии;
-воспалительные заболевания кишечника (ВК – язвенный колит, болезнь Крона);
-синдром раздраженного кишечника (СПК, особенно с диарейным синдромом).

Клиническая значимость

Состав показателей:

Зонулін (кількісне визначення)

<61- optimal, appropriate levels of intestinal permeability;
61-107-  intermediate, which may represent a slight increase in intestinal permeability indused bu zonilin;
>107 - increased, compatible with an increase in intestinal permeability.

Правила подготовки

Правила доставки биоматериалов в лабораторию

Интерференция:

• На результат могут влиять:
  •тип питания
  •прием антибиотиков
  •прием пробиотиков
  •инфекции (не рекомендуется сдавать исследования во время острой кишечной инфекции)
  •ожирение
  •активность воспалительного процесса в кишечнике
  
  

Интерпретация:

• 
  Интерпретацией результата должен заниматься квалифицированный специалист, четко понимающий преимущества и ограничения теста в контексте всех клинико-анамнестических данных. Неправильное использование теста может увеличить вероятность постановки ошибочного диагноза и привести к ненужным вмешательствам и снижению качества жизни пациента.
  1. Нормальный уровень
  Концентрация: < 60 нг/мл
  Клиническая трактовка: Цельность кишечного барьера сохранена.
  Функция плотных контактов между эпителиоцитами не нарушена. Риск наличия синдрома повышенной кишечной проницаемости к моменту обследования минимален.
  2. Умеренно повышенный уровень («Серая зона»)
  Концентрация: 60 – 107 нг/мл
  Клиническая трактовка: Начальные или транзиторные нарушения проницаемости слизистой. Может наблюдаться при незначительном дисбиозе, начальных этапах СИБР, алиментарных погрешностях (эпизодическое употребление большого количества глютена или простых сахаров) или на фоне недавнего короткого курса НПВП.
  Тактика: Рекомендуется динамический контроль через 4-6 недель и коррекция рациона.
  3. Значительно повышенный уровень (диагностически значимый)
  Концентрация: > 107 нг/мл
  Клиническая трактовка: Маркер выраженной деструкции плотных контактов и синдрома «дырявой кишки». Свидетельствует об устойчивом патологическом различии межклеточных стыков под влиянием триггеров.
  Клинические ассоциации: Характерно для активной фазы целиакии, непереносимости глютена без целиакии (NCGS), обострения воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК) или выраженной НПВП-энтеропатии. Прогрессирование этого состояния приводит к неконтролируемому проникновению макромолекул и эндотоксинов в системный кровоток.
  Тактика: Необходимо немедленное уяснение первопричины (дифференциальная диагностика), назначение строгой элиминационной диеты и запуск интенсивного протокола регенерации слизистой оболочки (мукопротекторы, L-глутамин, таргетные пробиотики).

  Зонулин может повышаться при:
  • кишечном воспалении
  •инфекции (ОКИ бактериальные или вирусные, СИБР)
  •у глютенчувствительных лиц
  •при ожирении